猪流感病毒 (H1 亚 型 ) ELISA 抗体检测试剂盒说明书

猪流感病毒 (H1     亚 型 ) ELISA 抗体检测试剂盒说明书

【兽药名称】

通 用 名  猪流感病毒 (H1  亚 型 )ELISA 抗体检测试剂盒

商 品 名 无

英 文 名  ELISA  Kit  for  Swine  Influenza  Virus(HI  Subtype)Antibody  Detection 汉语拼音  Zhuliuganbingdu(H1 Yaxing)ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要成分与含量】

【作用与用途】  用于检测 H1  亚型猪流感病毒血清抗体。

【注意事项】

(1)实验前，将试剂盒所有组分取出置温箱(25℃±3)回温至少30分钟，实验完成 后放回2～8℃保存。

(2)若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。 3请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

4)没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内，于2～8℃存放。

(5)避免底物液暴露于强光，避免接触氧化剂。

(6)先使用血清稀释板稀释完所有的待检血清，再将稀释好的血清转移到抗原包被板 上，使反应时间一致。

(7)浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

(8)严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常 必要的。

【用法与判定】

1  用 法

1.1     样品准备  取动物全血，待血液凝固后，以4000r/min  离心10分钟，收集血清； 或待血液凝固后自然析出血清。血清应清亮，无溶血。

1.2  洗涤液配制  使用前，将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作20倍稀释(例如：

10ml  的浓缩洗涤液加上190ml 纯水),混匀。置2～8℃保存，可保存7日。

1.3  待检血清和对照的稀释

1.3.1     待检血清的稀释   将待检血清在血清稀释板中按1:40稀释(例如：195 μl 样 品 稀释液中加5 μl 待检血清)

1.3.2 对照的稀释  阳性和阴性对照无需稀释。

1.4 操作步骤

14.1   取抗原包被板(根据样品多少，可拆开分次使用),每孔加入稀释好的洗涤液 300μì,无需静置，甩掉板孔中的洗涤液，洗涤1次，在吸水材料上拍干。

1.4.2  将稀释好的待检血清和阴、阳性对照各取100 μl加入到抗原包被板孔中，待检血 清设1孔，阴性对照、阳性对照各设2孔，置37℃温育30分钟。

1.4.3     甩掉板孔中的液体，每孔加入稀释好的洗涤液300μl,   无需静置，甩掉板孔中的

洗涤液，共计洗涤5次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.4.4  每孔加入酶标记物100μl, 置37℃温育30分钟。

1.4.5 洗涤5次，方法同1.4.3。

1.4.6  每孔加入底物显色液100μ,置室温(20～25℃)避光显色10分钟。

1.4.7     每孔加入终止液50μl,10     分钟内在酶标仪上测定各孔OD630mm值 。

2  判 定

2.1    成 立 条 件 阳 性 对 照OD630nm平均值应≥0.6;阴性对照OD₆30nm平均值应<0:3。

2.2    判 定 标 准S    为 样 品OD630mm值 ，P 为阳性对照OD₆30mm平均值，计算S/P   值。

如果S/P≥0.25,        判为阳性；如果S/P<0.25,       则判为阴性。

【规格】   96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【贮藏与有效期】2～8℃保存，有效期为12个月 

仅供科研使用