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更新时间:2025-10-23
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牛病毒性腹泻病毒抗体(p80)竞争ELISA检测试剂盒说明书
产品名称
中文名称:牛病毒性腹泻病毒抗体(p80)竞争 ELISA 检测试剂盒
英文名称:Bovine Viral Diarrhea virus (p80) Competitive ELISA antibody test kit
作用与用途
通过检测牛血清样品中的牛病毒性腹泻病毒抗体水平。
试剂盒组成
组成成份 | 1*96T | 2*96T | 5*96T |
抗原包被板 | 1 块(96 孔/块) | 2 块(96 孔/块) | 5 块(96 孔/块) |
酶标抗体 | 1 瓶(15ml/瓶) | 1 瓶(30ml/瓶) | 1 瓶(60ml/瓶) |
20X 洗涤液 | 1 瓶(30ml/瓶) | 1 瓶(60ml/瓶) | 2 瓶(60ml/瓶) |
阳性对照 | 1 管(0. 1ml/管) | 1 管(0.2ml/管) | 1 管(0.5ml/管) |
阴性对照 | 1 管(0. 1ml/管) | 1 管(0.2ml/管) | 1 管(0.5ml/管) |
底物 A 液 | 1 瓶(8ml/瓶) | 1 瓶(15ml/瓶) | 1 瓶(30ml/瓶) |
底物 B 液 | 1 瓶(8ml/瓶) | 1 瓶(15ml/瓶) | 1 瓶(30ml/瓶) |
终止液 | 1 瓶(8ml/瓶) | 1 瓶(15ml/瓶) | 1 瓶(30ml/瓶) |
说明书 | 1 份 | 1 份 | 1 份 |
板贴 | 3 张 | 6 张 | 15 张 |
操作步骤与判定
1.操作步骤
1. 1 试剂准备:20X 洗涤液需用蒸馏水或去离子水稀释成 1X 洗涤液(即 1 份 20X 洗涤液加入 19 份蒸馏水)。
1.2 实验准备:取出包被板,记录好样本的位置。如需使用部分板条,则将需要的板条拆下进行实验,将剩余的板条置于 2-8℃干
燥保存。
1.3 加样/对照:分别将 20µl 待检样品和阴、阳性对照加入到抗原包被板孔内,其中阴、阳性对照各加 2 孔;注意每个样品使用不 同的吸头。
1.4 加酶:每孔加入 80ul 酶标抗体 ,轻轻振荡混匀 ,封板后置于 37℃温育 30 分钟。
1.5 洗涤:弃去孔内液体 ,每孔加入 300µl 1X 洗涤液 ,洗涤 4 次 ,在最后一次 1X 洗涤液弃去后 ,将孔中残留的 1X 洗涤液拍干。
1.6 显色:每孔先加入 50µl 底物 A 液 ,再加入 50µl 底物 B 液 ,轻轻振荡混匀 ,封板后置于 37℃温育 15 分钟。
1.7 终止:每孔加入 50µl 终止液 ,轻轻振荡混匀 ,测定 OD450nm波长处各孔的吸光值。
2.判定
2. 1 实验成立条件 :阴性对照 OD450nm 平均值-阳性对照 OD450nm 平均值≥0.3。
如果实验结果不成立 ,有可能是实验操作失误造成的 ,应按操作步骤进行重复实验。
2.2 S/N 值= 阴性对照 OD450nm 均值
2.3 结果判定 :S/N 值≥0.3 ,判为阴性; S/N 值<0.3 ,判为阳性。
3.注意事项
3. 1 试剂盒严禁冻结 ,试剂盒从 2-8℃冰箱中取出后需室温放置 30 分钟以上 ,完quan恢复至室温方可使用 ,使用后应立即密封放置
2-8℃保存。
3.2 使用前需确认试剂盒有效期 ,应在有效期内使用。
3.3 所有试剂严禁接触皮肤和粘膜 ,检测结束后所用耗材按国家规定进行无害化处理。
3.4 底物 B 溶液变蓝,则不能使用。
3.5 每个血清样品 1 个吸头 ,避免交叉污染。
3.6 待检血清样品数量较多时 ,应尽量缩短加样时间。
3.7 终止反应后立即用酶标仪读数,应在 10 分钟内完成。
3.8 所有样品、洗涤液和各种废弃物都应灭活处理。
3.9 严格按照实验操作步骤操作。
3. 10 仅用于科研或遵守当地法律法规。
规格
1*96T/盒 ,2*96T/盒 ,5*96T/盒
贮藏条件及有效期
2~8℃保存 ,有效期为 12 个月。
仅供科研使用