棘球蚴（包虫病）基因工程亚单位疫苗ELISA 抗体检测试剂盒说明书

棘球蚴（包虫病）基因工程亚单位疫苗ELISA 抗体检测试剂盒说明书

【兽用名称】

通 用 名  棘球蚴（包虫病）基因工程亚单位疫苗 ELISA 抗体检测试剂盒

商 品 名  无

英 文 名  ELISA kit to Detect Antibody Against the Recombinant Hydatids Subunit Vaccine

汉语拼音 Jiqiuyou(Baochongbing) Jiyingongcheng Yadanweiyimiao ELISA Kangtijiance Shijihe

【主要成分与含量】

【作用与用途】 用于检测羊、牛免疫棘球蚴（包虫病）基因工程亚单位疫苗后的免疫抗体。 【注意事项】

（1）实验前，将试剂盒所有组分取出置温箱（25℃± 3） 回温至少30 分钟，实验完成后 放回2～8℃保存。

（2）若试剂盒阴阳性对照、酶标记物出现少量悬浮物，属正常现象。

（3）请在试剂盒规定的有效期内使用；禁止非同批试剂盒混用。

（4）没有用完的抗原包被板应贮存在密封塑料袋内，于 2～8℃存放。

（5）避免底物显色液暴露于强光，避免接触氧化剂。

（6）先使用血清稀释板稀释完所有的待检血清，再将稀释好的血清转移到抗原包被板上， 使反应时间一致。

（7）浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水稀释，如果发现有结晶加热使其溶解后再使用。

（8）严格按照操作程序，仔细的吸液、计时，充分洗涤，对于获得精确的结果是非常必 要的。

【用法与判定】

1    用法

1. 1    样品准备  取动物全血，待血液凝固后， 以 4000r/min 离心 10 分钟，收集血清； 或待血液凝固后自然析出血清，再收集血清。血清应清亮，无溶血。

1.2    洗涤液配制  使用前，将 20 倍浓缩洗涤液用蒸馏水或纯水作 20 倍稀释（例如： 10ml 的浓缩洗涤液加上 190ml 纯水），混匀。置 2～8℃保存，可保存 7 日。

1.3    血清稀释

1.3. 1    待检血清的稀释   将待检血清在血清稀释板中按 5 倍稀释（例如：80μl 样品稀 释液中加 20μl 待检血清）。

1.3.2    对照的稀释  阴性对照和阳性对照不作稀释。

1.4    操作步骤

1.4. 1    取抗原包被板（根据样品多少，可拆开分次使用） ，每孔加入稀释好的洗涤液 300μl ，无需静置，甩掉板孔中的洗涤液，重复洗板共计 2 次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.4.2    先将阴性对照、阳性对照和稀释好的待检血清各取 50µl  加入到抗原包被板孔 中，待检血清设 1  孔，阳性对照和阴性对照各设 2  孔，然后加入酶标记物 50μl  至各反应 孔中，置 37℃温育 30  分钟。

1.4.3    甩掉板孔中的溶液，每孔加入稀释好的洗涤液 300µl ，无需静置，甩掉板孔中的 洗涤液，重复洗板共计 5  次，最后一次在吸水材料上拍干。

1.4.4    每孔加入底物显色液 100µl ，置室温（20~25℃) 避光显色 10  分钟。

1.4.5    每孔加入终止液 50µl ，10  分钟内在酶标仪上测定各孔 OD 450nm    值。

2    判定

2. 1    成立条件  阴性对照 OD450nm   平均值与阳性对照 OD450nm   平均值之差≥0.5 ，阳性 对照 OD450nm 值的抑制率＞50%。

2.2    判定标准  S 为样品 OD450nm 值，N 为阴性对照 OD450nm 平均值，计算样品抑制率。 抑制率=（ 1—    ） ×100%

若被检样品的抑制率≥50%判为阳性；

若被检样品的抑制率＜50%判为阴性；

【规格】  96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒 

【贮藏与有效期】  2～8℃保存，有效期为为 12 个月 

仅供科研使用