非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒说明书

非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒使用说明书

【兽用名称】

商 品 名  非洲猪瘟病毒间接ELISA抗体检测试剂盒

英 文 名  Indirect ELISA kit for Detection of Antibodies to African Swine

          Fever virus

【主要组分与含量】

【作用与用途】  用于检测非洲猪瘟病毒抗体。

【注意事项】

1  试剂盒使用前各试剂应恢复至25℃，未使用完的试剂置2~8℃保存。

2  待检血清数量较多时，应先在血清稀释板中进行待检血清的稀释，

   再转移至抗原包被板中，保证所有样品反应时间的一致。

3  应严格遵守各操作步骤规定的时间和温度。

4  不同批的试剂盒组分不得混用，不同试剂使用时应防止交叉污染。

5  移液时应尽量准确，防止产生气泡。

6  底物显色液避免暴露于强光或接触氧化剂。

7  使用过的材料应无害化处理，处理时遵照当地、区域以及国家法规。

【作用与用途】  用于检测猪血清样品中的非洲猪瘟病毒抗体。

【用法与判定】

1  用法

1.1  样品处理  取猪全血，血液充分凝固后，3000r/min离心10分钟，收集上清液。血清应清亮，无溶血。

1.2  待检血清的稀释  将待检血清在血清稀释板中进行40倍稀释（如：195μl样品稀释液中加5μl待检血清）。

1.3  洗涤液制备  将20倍浓缩洗涤液恢复至25℃至完quan溶解，用蒸馏水或纯水作20倍稀释，置2~8℃保存，可保存7日。

1.4  操作步骤

1.4.1  取适量的抗原包被板，每孔加入300μl洗涤液，洗涤1次，拍干。再将稀释好的待检血清、阳性对照和阴性对照（对照不必稀释）各取100μl加至抗原包被板中，待检血清设1孔，阳性对照和阴性对照各设2孔，置37℃温育30分钟。

1.4.2  弃去孔中液体，每孔加入300μl洗涤液，重复洗涤5次，最后一次拍干。

1.4.3  每孔加入100μl 酶标二抗，置37℃温育30分钟。

1.4.4  弃去孔中液体，洗涤方法同1.4.2。

1.4.5  每孔加入100μl底物显色液，置25℃避光显色10分钟。

1.4.6  每孔加终止液50μl，10分钟内读取OD_630nm值。

2  结果判定  试验成立条件是：阳性对照OD_630nm平均值≥0.6，阳性对照OD_630nm平均值与阴性对照OD_630nm平均值之差≥0.5。

S为样品OD_630nm值，P为阳性对照OD_630nm平均值，N为阴性对照OD_630nm平均值。

若S/P≥0.200，样品判定为阳性；若S/P<0.200，样品判定为阴性。

【规格】 96 孔/盒或192 孔/盒或480 孔/盒

【贮藏与有效期】  2~8℃保存，有效期为12个月。  

   仅供科研使用